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RP-HPLC定量三乙胺法测定中药黄连中盐酸小檗碱的含量

 目的：建立一种反向高效液相色谱(RP·HPLC)法测定黄连中盐酸小檗碱的含量。方法：采用HPLC法，色谱柱为LunaC18柱(150mm×4．60mill，5m)，流动相为乙腈-0．1％磷酸(25：75)，每lOo0ml0．1％的磷酸溶液中加入50txl的三乙胺(扫尾剂)进行洗脱；检测波长为340nm。结果：采用HPLC法检测黄连中盐酸小檗碱的含量，其在0．246—2．460ixg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。平均加样回收率为100．1％，相对标准偏差(RSD)为1．60％。结论：HPLC简便可行、重复性好，可作为检测盐酸小檗碱含量的质量控制；一定量的三乙胺分析纯可作为很好的扫尾剂，用于盐酸小檗碱的含量测定。[关键词]黄连；盐酸小檗碱；高效液相色谱黄连为毛茛科植物黄连(coptischinensisfranch)、三角叶黄连(CoptisdehoideaC．Y．ChenetHsiao)或云连(CoptisteetaWall1．)的干燥根茎，主要含有小檗碱、黄连碱、药根碱、甲基黄连碱等生物碱成分，其中以小檗碱含量最高J。《中国药典》(2005年版)中测定黄连中小檗碱含量的方法主要为薄层色谱法j。此外，采用高效液相色谱(HPLC)法可更加精确鉴定黄连中盐酸小檗碱及其含量。盐酸小檗碱(Berberine)为非处方药，具有广泛的药理作用。近年来国内外研究发现，在体外该类化合物浓度在每毫升微克级水平时，可抑制人白血病K562细胞、食管癌YES细胞、肝癌HepG2细胞、结肠癌colon26／colon20细胞、人早幼粒白血病HL一60细胞、人胃癌SGC一7901细胞、鼻咽癌CNE一2Z细胞等多种肿瘤细胞的生长，促进人早幼粒白血病HL-60细胞、人胃癌细胞MGC一803和SGC一7901的分化，诱导人胃癌MGC一803和BGC823细胞凋亡3J，促进Hela细胞凋亡j。作者首次使用反向高效液相色谱(RP—HPLC)法测定黄连中盐酸小檗碱的含量，为控制黄连药材、黄连提取物中间固体和盐酸小檗碱片的质量提供参考。

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